Download file here:
Simultaneous assay of pigments, carbohydrates, proteins and lipids in microalgae.pdf
Microalgae Cultivation and Harvest
- Menggunakan mikroalga N. salina dan D. salina
- Dikultivasi dalam medium f/2 (CCAP Recipe)
- Ditumbuhkan dalam labu erlenmeyer 1L di atas shaking platform pada suhu 25C dengan durasi pencahayaan 12 h light/dark cycles
- Diambil sampel sebanyak 1.5 ml dari berbagai tahap pertumbuhan (OD 0.05 - 1.5)
- Disentrifugasi (3000 x g selama 10 menit)
- Dibekukan pada suhu -20C
Reference Pigment Assay
pigmen sel dideterminasi menggunakan metode spetrofotometrik setelah ekstraksi dengan acetone 80%
Step:
- Ambil 2 ml sampel dari kultur, isi dengan aquades lalu disentrifugasi
- Endapan yang dihasilkan lalu disuspensikan kembali di 0.4 ml buffer phosphate 0.1 M
- Lalu dimasukkan ke dalam bead-beating cell disruptor selama 10 menit
- Setelah itu dilakukan penambahan 1.6 ml acetone untuk membentuk aceton 80%,
- lalu divortex selama 2 menit dan diinkubasi di kegelapan selama 15 menit
- Setelah itu disentrifugasi kembali, yang kemudian supernatannya akan dilakukan pembacaan absorbansi menggunakan spektrofotometri
Masing-masing klorofil A dan B dapat dianalisis menggunakan pembacaan spektro dan persamaan berikut: